當樣品的進樣量在**范圍內時，改變進樣量會相應地影響峰高和峰面積。但保留時間、峰寬和分辨率的影響很小。當注射量或質量過大時，會引起過載現象。隨著峰寬的增加，峰形變差和分辨率降低是不可避免的

對于長度為50-250mm，內徑為4-5mm的色譜柱，單次進樣的進樣質量應小于50μg，進樣體積應小于25μL。過載分為體積過載和質量過載兩種，下面將介紹兩種過載對分離的影響。

（1） 體積過載：下圖顯示了分別含有10、40、60、80和100μL的1mg/mL連翹苷的色譜圖。可以看出，10μL的峰型*好，40μL的峰面積*大，隨著進樣量的增加，峰型越明顯。

（2） 質量過載：下圖是氨基酸及其衍生物的測定，顯示了正常和超大質量條件下的峰形狀。

過載會影響色譜峰的形狀，只有當樣品的體積和質量在合適的范圍內時，才能得到良好的峰形狀。現在，我們將繼續討論哪些因素會導致領 先區域或落后區域。

領 先區域：（拖尾系數<0.95）

1.溶劑效應的影響

（1） 用流動相溶解樣品：（姜黃素標準品）

（2） 首先用強溶劑溶解樣品，然后用流動相稀釋：（石杉堿標準）

2.緩沖作用不當：（注射苦參堿）

3.儀表系統不正確

在傳統液相色譜儀上使用Ultisil®XB-C18柱（4.6×50mm，1.8μm）時，其峰形將受到系統大死體積的影響。

拖尾面積：（拖尾因子<0.95）

1.降低pH值并抑制二氧化硅羥基的電離。

2.增加緩沖鹽，提高緩沖效果

3.由于每種緩沖鹽的緩沖容量不同，可以通過改變緩沖鹽來調整

4.屏蔽二氧化硅的影響（如添加三乙胺）

在我們的定性和定量檢測分析中，峰的形狀對我們的實驗結果有很大的影響，因此確保良好的峰形狀是我們實驗成功的關鍵，而異常峰形狀的檢測和解決當然是我們實驗分析的一項重要技能。