HPLC柱溫控
在高效液相色譜儀中,需要高效液相色譜柱和一些檢測器來精 確控制工作環境的溫度,對色譜柱恒溫的要求非常高。溫度對溶劑的溶解度、HPLC 色譜柱的性能和流動相的粘度都有影響。一般來說,升高溫度可以增加溶質在流動相中的溶解度,從而降低其分配系數,但對分離選擇性影響不大;它還可以降低流動相的粘度,從而改善傳質過程,降低柱壓。但是,如果溫度過高,則容易在流動相中造成氣泡。
HPLC柱溫變化
不同的探測器對溫度的敏感度不同。HPLC柱的不同工作溫度對保留時間和相對保留時間有影響。在凝膠色譜中使用軟填料時,溫度會引起填料結構的變化,從而影響分離。但是,如果使用硬填料,效果并不顯著。
高效液相色譜柱的保護和再生
在色譜分析系統中,高效液相色譜柱主要起到分離和檢測物質的作用,如色譜系統的心臟,也是易損產品。一些保留值較小的物質,如鹽類,更容易被沖入色譜柱,而另一些保留值較強的物質,流動相溶液不足以洗脫這些物質。
在多次取樣后,這些吸附在柱子表面的物質通常會積聚在柱頭中。當吸附的樣品組分積累到一定程度時,就會形成新的固定相,改變分離機理,使樣品保留時間發生波動,出現拖尾現象。
為延長色譜柱的使用壽命,曾有人指出應在分析柱前接小保護柱。作用是收集和阻擋來自進樣器的機械和化學雜質,以保護和延長分析柱的使用壽命。
因此,選擇保護柱的原則是在滿足分離要求的前提下,盡可能選擇分離樣品保留率低的短保護柱。